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淋球菌的基因探针诊断

放大字体  缩小字体 发布日期:2024-12-27   浏览次数:37

  淋球菌的基因探针诊断

  淋球菌的基因探针诊断所用的探针有:质粒DNA探针染色体基因探针和rRNA基因探针。

  (1)质粒DNA探针

  ① 隐蔽质粒DNA探针淋球菌质粒分为三种:接合质粒分子最大为36kb DNA; 耐药性质粒包括两个质粒DNA长分别为5.6kb和7.1kb;隐蔽质粒4.2kb其中隐蔽质粒存在于96%的临床淋球菌分离株中其它奈瑟菌不含有此质粒故可用它的序列作为特异DNA探针检测淋球菌Torres采用核酸杂交技术检测淋球菌所用探针为隐蔽质粒用该探针对134株淋球菌和131株相关菌株的检测有124株淋球菌杂交反应阳性占93%还可与个别其它的奈瑟菌出现交叉反应对测定探针的敏感性实验表明可检出102CFU淋球菌研究证明隐蔽质粒中CPPB基因序列在所有的淋球菌染色体中(包括不含该质粒的菌株)因此CPPB基因探针具有良好的特异性和敏感性Torres等用CPPB基因探针检测了201份临床标本 采用非放射性地高辛标记系统 其敏感性和特异性分别为95%和98%

  ② 耐药性质粒DNA探针

  淋球菌的抗药质粒可分为:①产青毒素酶淋球菌(PPNG)其β-内酰胺酶阳性;②具有高水平的质粒介导的耐四环素淋球菌(TRNG)。

  PPNG菌株是1976年首次在实验室分离得到的该菌中含有编码产青毒酶的基因该基因既可整合于染色体上也可出现在质粒DNA中而后者居多称之为产青毒素酶质粒质粒有二种大小分别为7.4kb和5.3kbPescador1998年设计一特异的检测淋球菌编码β-内酰胺酶基因的探针采用酶化学发光法标记液相杂交用测光计测是特异杂交体的光量在4h内可检测104-105CFU的PPNG菌株TRNG菌株虽对四环素耐药但通常对β-内酰胺酶类及喹诺酮类抗菌素敏感因此在实验室药敏检测中可归为敏感细菌Pescador用抗四环素淋球菌(TRNG)tetm基因的寡核苷酸探针,该基因介导抗四环素,用酶化学发光标记,液相杂交,4h内可直接从临床标本中检出含有tetm基因的1.5×104CFu的淋球菌。

  (2)染色体探针

  染色体探针包括已知功能的基因探针如菌毛DNA探针和paI基因探针这些基因在淋球菌感染人细胞的过程中起着重要作用;未知功能的基因探针这些探针序列与染色体的特定序列互补但目前还不知这些基因序列的功能以上两种染色体探针由于在淋球菌中互补序列的拷贝数较低检测灵敏度较低因此一般用的不多除非有特殊的研究目的。

  (3)rRNA基因探针

  rRNA基因探针是将与rRNA互补的DNA作为探针该探针的靶序列是rRNA序列rRNA的基因探针的特点是:①可以增加探针检测的灵敏度rRNA基因探针可同时检测rRNA分子和DNA分子;②rRNA具有进化上的保守性;③杂交方法简便快速;④由于rRNA的含量较高标本不需增菌美国Gen-Probe公司生产的淋球菌检测探针PACE C是以rRNA 及其基因为检测靶序列采用放射性标记在2h内可以完成检测Peter用这种探针检测395个临床标本结果灵敏度和特异性分别为92.9%99.4%他认为PACE C系统筛查临床标本中淋球菌是一个可靠的方法该探针还可以检测无症状淋球菌感染者这是目前培养难于达到的。

  小齐,17岁,高二学生

老妈要出差了,临走前塞给我一个包包,说这是你的生活费。我没在意,她经常出差,这种“离别仪式”是常有的事。两天后,我从包包里拿钱,和钱一起掉出来的还有一个扁扁的小塑料袋,一看封口的字,我一下红了脸,她竟在生活费里夹了“避孕套”。我知道这是林小薇来我家洗澡造成的冲击波,可是她不过是洗个澡,老妈何必胡思乱想!

  林小薇是我的女朋友,上周末一放学,她就来到我家,说趁我老妈出差,要和我来个周末会餐。做完饭,小薇说浑身是酱油味,要洗个澡。我家客厅直冲着卫生间,怕我偷看,小薇让我搬一个凳子背朝墙坐在卫生间门外,一只手按在门的玻璃上,只要手一动,就说明我在偷窥,她“饶不了我”。

  照着她的设计,我坐在门外,听着“哗哗”的水声,体内涌起一阵阵燥热。遐想之间,眼前掠过小薇走入浴室的从容,一个问号横空出世,难道她不是第一次在男生家沐浴沮丧和不满袭上心头,身上的燥热冷却了不少。

  没想到小薇从卫生间出来时,与老妈“意外撞车”了。我打定主意,死也不能承认我和林小薇在谈恋爱。爸妈离婚后,一有机会妈就把爸过去的风花雪月拿出来抖落一番,说什么你可别学你爸爸,男的最容易在这方面栽跟头。所以在草木皆兵的老妈面前,承认“早恋”,无疑是自寻死路。

  可是那晚老妈还是“直奔主题”,耐不住她唠叨,我恼羞成怒地跑出来了。我很想去找爸爸,小时候我和妈妈一起恨过他,我很想对他说说我心里的郁闷,听听他的意见

  熟悉我的人都说我和林小薇不合适,她穿着出位,行事张扬,高一时她的前男友来找她,当着同学的面,她敢抱着他的腰扬长而去。开学没多久,我俩就成了冤家对头,我是主管纪律的副班长,而林小薇因违反校规经常受到我的“教育”。每次说她,她不是爱理不理,就是一脸不屑:“班副,我只认宪法!”我晕,这个“小太妹”!

  后来知道她进我们学校是她老爸出钱赞助的,我更有了鄙视她的理由。没料到,到了高一下半期,我们的关系突然有了戏剧性的变化。那是一次班会,由我组织到公园去。到公园后,大多数同学都溜了,唯有小薇和她的几个死党仍在“坚守”。后来,我才知道是她花钱请她们守住阵地的。我问她为什么要这样做,豪放的她突然忸怩起来,半晌迸出一句让我摸不着头脑的话:“人家穿了两个星期校服了。”

  小薇以她的“出位”硬生生地挤进了我的生活。我问她喜欢我什么,她说,我比她认识的男孩成熟,有责任感。她问我喜欢她什么,我答不上来。我俩的共同点不多,我爱看人物传记类的书,喜欢登山、打篮球,她爱看卡通片,喜欢蹦迪、逛街。可是这不影响我俩经常约会。第一次看电影时,小薇主动吻了我,这让我兴奋,可她熟稔的动作又让我不快。看来她是情场老手。

  在爸爸的家门前徘徊了几次,我还是没有进去,也许我在爸爸心里早就没有了位置。回到家,一连几天,我都躲着老妈,我不知道能对她说什么。老妈时常把“抵制诱惑”的道理放在嘴边,好像和女孩一拉手就是犯“生活错误”。而和小薇谈恋爱后,向往和内疚成了我的两极世界,晚上在梦里想入非非,白天看到她又觉得羞愧。作家和诗人总是一厢情愿地歌颂青春的美好,谁也体会不到我们被青春燃烧的焦灼。

  最让我吃惊的是,第二天,小薇探知了老妈对我的责任教育时,竟连连点头,说:“小齐哥,阿姨说得对,我喜欢你,当然不愿意你甩了我。”天,原来天下女人都一样。几经斟酌,我决心和小薇拉开距离,我承担不了她要的“责任”。偏偏在这时,老妈准备了避孕套,就像好不容易下决心减肥,家长非要你吃红烧肉一样。

  不过,仔细想想,老妈的话也有几分道理,在我们的“恋爱游戏”中,大人们想的是“责任”,我们想的只是“快乐”。这个薄薄的塑胶袋是“性”的“通行证”,可是站在“性”的门前,我犹豫了,我不知道我能和小薇走多远。

 

 
 
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